革兰氏染色法的步骤

革兰氏染色法的步骤

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原理:革兰氏染色可将所有细菌分为革兰氏阳性菌du(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两类，是细菌学中*常用的鉴别染色方法。这种染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁的特殊化学成分。

步骤：

(一)涂片固定

在干净的载玻片表面中央滴加一滴蒸馏水，用接种环严格无菌技术操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合可以做成菌悬液并涂布成直径约1cm的薄层。

(二)染色

在固定过的涂片菌膜上滴加草酸铵结晶紫染液，染色液应完全可以覆盖企业整个形成菌膜，染色1min。

(三)水洗

染料到一定时间后，取载玻片使其成450度角，用小水流冲洗掉多余的染料，染料被细菌吸附后残留。

(四)媒染

涂层表面用碘溶液覆盖1分钟。在媒染处理中，媒染剂与染料形成不溶性化合物，可增加染料与细菌的亲和力。

(5)水洗，用吸水纸吸水。

用细小的水流速度缓慢冲洗细胞涂片上的染色液，用吸水纸吸干。

(六)脱色

加95%酒精数滴，并轻轻摇动细胞计算脱色， 20s~30s后再充分水洗，吸去表面水分。

(七)复染

蕃红染色液染色10s后， 自来水冲洗。

(八)干燥，镜检

染色结果显示革兰氏阳性菌为紫色，革兰氏阴性菌为红色。

扩展资料

标本干燥后即固定，固定的目的有三个：

(1)杀死微生物，固定效应细胞结构。

(2)确保细菌能更牢固地附着在载玻片上，以免样本被水冲走。

和(3)改变染料对细胞的渗透性，因为死的原生质体比活的原生质体更容易染色。

资料来源: 百度-克染色法百科全书

来源:百度百科-革兰氏染色